하이브리도마 세포 확장 및 서브클로닝 배지

产品信息 상품 설명

产品名称

제품명

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

하이브리도마 세포 확장 및 서브클로닝 배지

货号 Cat.No

BRS-MED02

规格

사양

500ml/瓶

500mL/병

产品组分

구성요소

DMEM基础培养基:80%(体积比)

DMEM 기본 매체: 80%(v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

소태아혈청(FBS, 수입): 10%(v/v)

条件培养基:10%(体积比)

조절된 매체: 10%(v/v)

정량:100单位/mL

페니실린: 100U/mL

链霉素:100 单位/mL

스트렙토마이신: 100U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

기타 첨가제: 단일-세포 증식 인자 및 소분자 보충제

保存条件

보관 조건

-20도 保存,有效期 18 个月.

-20도 보관, 유통기한 18개월

使用方法

사용 지침

培养基融化:

37도 水浴融化本培养基, 乙醇消毒외장면后置超净台备용;

注:本品融化后流现少weight白color絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

매체 해동:

37도 수조에서 배지를 녹입니다. 70% 에탄올로 외부 표면을 닦은 후 생물안전 캐비닛에 넣어 사용하세요.
참고: 해동 후 소량의 흰색 응집 물질이 나타나는 것은 정상입니다. 플록이 가라앉을 때까지 배지를 3~5분 동안 방치한 후 사용할 상층액을 수집합니다.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融합孔(比如孔内培养基颜color正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等) 可直接使 용 黄枪头轻轻吹打融합합,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺板.

융합 웰 취급 – 건강한 세포:

양호한 상태의 세포가 있는 융합 웰의 경우(예: 중간 색상 정상 또는 약간 노란색, 현미경으로 관찰한 세포는 건강하고 밝고 정상 크기로 나타남) 노란색 피펫 팁을 사용하여 부드럽게 피펫을 위아래로 피펫합니다. 200 μL 배지에서 세포와 플레이트를 0.8-1.5 세포/웰로 계산합니다.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

융합 웰 처리 - 최적이 아닌 세포:

최적이 아닌 상태의 세포가 있는 융합 웰의 경우(예: 중간 정도의 산성화/노란색 또는 세포가 현미경으로 보면 오그라들고 어둡게 나타남) 후속 서브클로닝에 두 가지 옵션을 사용할 수 있습니다.

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内, 2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul(培养基), 此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好, 不常适于亚克隆铺板;

옵션 1: 융합 세포를 이 배지 1mL가 들어 있는 24웰 플레이트로 옮깁니다. 확장 2~3일 후, 세포 수를 세고 200 µL 배지에서 웰당 0.8~1.5 세포로 서브클로닝을 수행합니다. 이 단계에서는 세포 배가가 제한되지만 세포 상태가 양호하여 서브클로닝에 이상적입니다.

第2种方式是使사용黄枪头작은심장吸弃融합침상清, 每孔补充200ulnew鲜的本培养基,至37도5% CO2静置培养3-4소수,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

노란색 피펫 팁을 사용하여 융합 웰에서 상급체를 조심스럽게 제거하고 웰당 200 μL의 신선한 배지를 추가합니다. 37도, 5% CO2에서 3~4시간 동안 배양합니다. 그런 다음 세포를 샘플링하고 계수한 후 200 µL 배지에서 0.8-1.5 세포/웰로 서브클로닝을 수행합니다.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

참고: 하이브리도마 세포 확장 및 서브클로닝 배지로 배양된 서브클론은 일반적으로 서브클로닝 후 6~8일에 다운스트림 스크리닝 또는 분석에 적합한 단계에 도달합니다.-