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자주 묻는 질문(FAQ)
Biorunstar는 펩타이드 합성을 위해 어떤 합성 방법론을 사용합니까?
RE: Biorunstar는 고객의 요구 사항을 충족하기 위해 다양한 솔루션 단계 합성 방법론을 개발했습니다. 일반적으로 고체상 Fmoc 화학이 적용됩니다.
펩타이드를 어떻게 배송하나요? 어떤 QC 데이터가 제공되나요?
RE: 모든 펩타이드는 실온에서 잘 라벨이 붙은 개별 바이알에 담긴 동결건조 분말 형태로 DHL 또는 FedEx Express를 통해 배송됩니다. MALDI-MASS 분광법으로만 확인되는 조 펩타이드를 제외하고 모든 합성 정제 펩타이드에는 프로젝트 보고서(CoA), MS 데이터 및 HPLC 데이터가 함께 제공됩니다. 펩타이드 서열, 순도, 수량, 변형, 질량 스펙트럼 데이터 및 HPLC 데이터와 같은 주요 특성을 포함하는 데이터 시트가 제공됩니다.
펩타이드 합성의 일반적인 처리 시간은 얼마나 됩니까? 나에게 배송하는 데 얼마나 걸리나요?
답변: 아미노산이 30개 미만인 표준 펩타이드의 경우 일반적인 처리 시간은 2-3주입니다. 처리 시간은 펩타이드 길이, 양, 용해도 및 난이도에 따라 다릅니다. 다른 국가의 연구자에게 연락하는 데 일반적으로 3-5일이 소요됩니다.
언제까지 합성할 수 있나요?
RE: Biorunstar는 최대 130aa의 긴 펩타이드 합성에 대한 광범위한 경험을 보유하고 있습니다. 30 또는 40aa 미만의 펩타이드만 만드는 데 익숙한 많은 펩타이드 공급업체와 달리 Biorunstar는 40aa에서 90aa 범위의 펩타이드를 만드는 데 있어 좋은 경험을 갖고 있습니다. 특히 길이가 100aa 이상인 긴 펩타이드를 합성하는 것은 어렵습니다. 130aa 이상의 시퀀스를 합성하려는 경우 맞춤형 단백질 발현 및 정제 서비스를 문의해 주세요.
합성이나 정제 과정에서 문제가 발생하면 어떻게 하나요?
RE: 각 펩타이드에는 고유한 특성이 있습니다. 합성 과정에서 기대 이상의 문제가 발생하여 귀하의 펩타이드를 제때에 전달할 수 없는 경우, 최대한 빨리 알려드리겠습니다. 혹시 당사에서 펩타이드를 생산하지 못하는 경우에는 어떠한 비용도 청구되지 않습니다.
TFA 염 형태, 아세트산 또는 HCl 염 형태: 어떤 형태를 선택해야 합니까?
기본적으로 펩타이드는 TFA 염에서 합성됩니다. 세포 또는 조직 배양 관련 실험의 경우 비정상적인 반응을 피하기 위해 98% 이상의 아세테이트 또는 HCl 염 형태로 생성된 펩타이드를 고려해야 합니다. 아세테이트 또는 HCl 염 형태는 추가 비용으로 요청할 수 있습니다.
펩타이드의 유통기한은 어떻게 되나요?
RE: 펩타이드는 냉동고에 동결건조하여 보관할 경우 최소 1년 동안 안정적입니다. 펩타이드가 용해되면 유통기한이 단축될 수 있습니다. 펩타이드에 Trp, Met, 특히 Cys와 같이 산화될 수 있는 여러 반응성 아미노산이 포함되어 있는 경우 저장 수명도 단축될 수 있습니다.
펩타이드에는 여러 시스테인이 포함되어 있어 쉽게 이황화 결합을 형성할 수 있습니다. 이것을 어떻게 피합니까?
RE: 펩타이드 서열에 쉽게 산화되는 여러 시스테인이나 기타 반응성 아미노산이 포함되어 있는 경우 Biorunstar는 미량의 강력한 환원제인 DTT와 함께 펩타이드를 전달하도록 제안합니다. 고객이 특별히 허용한 경우에만 펩타이드가 DTT와 함께 전달됩니다.
합성 펩타이드를 어떻게 보관하나요?
답변: 대부분의 동결건조된 펩타이드는 실온에서 2-3주 동안 안정합니다. 장기간 보관하려면 동결건조된 펩타이드를 -20도에서 보관해야 합니다. 반복적인 동결-해동 주기를 피해야 합니다. 개봉하기 전에 실온에 두십시오. 펩타이드 용액의 유효기간은 제한되어 있습니다. 일단 제조된 펩타이드 용액은 가능한 한 빨리 사용해야 합니다.
조 펩타이드와 탈염 펩타이드의 순도는 얼마입니까? 펩타이드를 어떻게 정제하나요? 불순물은 무엇입니까?
RE: 15aa 미만의 정상 서열을 갖는 짧은 펩타이드의 경우 일반적으로 조 등급의 경우 HPLC에 의해 40-60%입니다. 탈염 등급에 대한 HPLC 기준 50-70%. 펩타이드의 길이가 길수록 원유 또는 탈염 제품의 순도가 낮아집니다. 펩타이드는 일반적으로 물과 아세토니트릴 구배를 사용하는 HPLC로 정제됩니다. 대부분의 불순물은 단편 또는 결실 펩티드, 불완전하게 보호된 펩티드, 잔류 염 및 물입니다.
HPLC, 총 펩타이드 함량 및 표적 펩타이드 함량을 통한 펩타이드 순도에 대한 설명.
RE: 바이오런스타에서는 동결건조된 분말의 총 중량에 따라 펩타이드를 배송합니다. 동결건조된 분말에는 단편 또는 결실 펩타이드, 불완전하게 보호된 펩타이드, TFA 및 잔류 수분과 같은 불순물이 포함되어 있습니다. 펩타이드 순도는 HPLC로 측정됩니다. 이는 ~214nm(펩타이드 결합이 흡수함)에서 흡수하는 모든 분석물에 대한 올바른 펩타이드의 양이며, 삭제, 잘림 또는 불완전하게 보호 해제된 서열 등일 가능성이 높습니다. HPLC에 의한 펩타이드 순도는 물과 염분을 고려하지 않습니다. 일반적으로 샘플에 존재하는 것입니다. 총 펩티드 함량은 동결건조된 펩티드 분말에 존재하는 모든 것에 비해 존재하는 총 펩티드의 백분율입니다. 총 펩티드 함량은 질소 함량 분석에 의해 결정됩니다. 따라서 동결건조된 펩타이드 분말의 목표 펩타이드 함량은 다음 공식으로 결론을 내릴 수 있습니다. 총 펩타이드 함량 X HPLC에 의한 펩타이드 순도.
플루오레세인 라벨링 방법은 무엇입니까?
RE: FITC(Fluorescein isothiocianate)는 Fluorescein 라벨링에 사용되는 활성화된 전구체입니다. 효율적인 N말단 라벨링을 위해 7원자 아미노헥사노일
스페이서(NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH)가 형광단(플루오로세인)과 펩타이드의 N-말단. 이 스페이서는 부착 지점에서 형광단을 분리하는 데 도움이 되며, 잠재적으로 형광단과 결합된 생체 분자의 상호 작용을 감소시키고 2차 검출 시약에 더 쉽게 접근할 수 있게 해줍니다.
스페이서(NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH)가 형광단(플루오로세인)과 펩타이드의 N-말단. 이 스페이서는 부착 지점에서 형광단을 분리하는 데 도움이 되며, 잠재적으로 형광단과 결합된 생체 분자의 상호 작용을 감소시키고 2차 검출 시약에 더 쉽게 접근할 수 있게 해줍니다.
비오틴(또는 FITC)의 C-말단 라벨링이 가능합니까?
RE: 네. 비오틴(또는 FITC)의 C-말단 라벨링은 펩타이드의 C-말단에 라이신 잔기를 추가하여 이루어지며, 비오틴(또는 FITC)은 아미드 결합을 통해 라이신 측쇄에 부착됩니다. 라이신의 양전하가 제거됩니다.
항체 생산에 적합한 펩타이드 길이는 얼마입니까?
RE: 일반적으로 10-25 잔기 펩타이드가 권장됩니다. 더 긴 펩타이드는 더 많은 에피토프를 가질 수 있지만, 본래의 형태가 아닌 안정적인 2차 구조를 형성할 가능성이 더 클 수도 있습니다. 더 짧은 펩타이드(<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.
MAP이란 무엇입니까?
RE: MAPS 또는 다중 항원 펩타이드는 선형 펩타이드 사슬이 폴리라이신 코어를 통해 C 말단에서 연결되어 전체 분자의 크기를 증가시키는 분지형 펩타이드입니다. 이는 KLH에 대한 펩타이드의 결합을 제거하기 위해 수행됩니다. 그러나 MAP의 펩타이드 형태는 유연성이 덜하고 MAP에 의해 얻은 항체는 일반적으로 기존 KLH 접합에 비해 표적 단백질을 덜 자주 인식하는 것으로 보입니다. 또한 MAPS를 만들 때 생성되는 유리 펩타이드가 없기 때문에 폴리리신 코어 지향 항체를 제거하기가 어렵습니다. MAPS는 HPLC를 이용한 정제가 어렵고, MAPS의 이질성 및 큰 분자 크기로 인해 질량 검증 없이 제공됩니다.
KLH 결합 펩타이드 용액이 탁하게 나타나는 이유는 무엇입니까?
RE: KLH 또는 Keyhole Limpet 헤모시아닌은 대규모 응집 단백질입니다(MW=4x105 – 1x107). 크기와 구조로 인해 물에 대한 용해도가 제한되어 외관이 흐려집니다. 이는 면역원성에 영향을 미치지 않으며 탁한 용액을 예방접종에 사용할 수 있습니다.
MALDI 스펙트럼의 M+Na 및 M+K 질량 피크를 설명할 수 있습니까?
RE: MALDI 스펙트럼에서 Na(나트륨) 및 K(칼륨) 부가물을 보는 것은 매우 일반적입니다. 나트륨과 칼륨은 펩타이드 용매에 사용되는 물에서 나옵니다. 증류수와 탈이온수에도 미량의 나트륨 및 칼륨 이온이 존재하며 이는 완전히 제거될 수 없습니다. 이들은 MALDI 질량 분석 과정 중에 이온화되어 펩타이드의 유리 카르복실 그룹에 결합합니다. 물에서 모든 단일 나트륨 또는 칼륨 이온을 제거하는 정수 시스템이 없기 때문에 때때로 나트륨 및 칼륨 부가물을 보는 것은 MALDI 질량 분석에서 매우 일반적이며 피할 수 없습니다. 이는 펩타이드가 순수하지 않다는 의미가 아니며, 잘못된 분자량과 혼동되어서도 안 됩니다.