펩타이드의 불안정성은 제형 연구의 주요 문제 중 하나이며, 이에 대한 이유는 다양합니다. 그러나 특정 펩타이드의 불안정성에 대한 주된 이유는 많지 않습니다. 외부 조건(예: pH, 온도, 빛, 산소 농도 등)이 펩타이드 안정성에 미치는 영향에 대한 자세한 연구는 합리적인 제형을 설계하는 데 도움이 될 수 있습니다. 첨가제가 펩타이드를 안정화시키는 메커니즘은 아직 완전히 이해되지 않았지만, 첨가제의 사용은 여전히 펩타이드 제제의 안정성을 향상시키는 주요 수단 중 하나입니다. CD 및 DSC와 같은 분석 방법을 적용하면 적합한 첨가제를 신속하게 선별하는 데 도움이 될 수 있습니다.
펩타이드 불안정성의 이유:
탈아미드화 반응: 탈아세틸화 반응에서는 Asn/Gln 잔기가 가수분해되어 Asp/Glu를 형성합니다. 비효소적 탈아미드화 반응이 수행됩니다. Asn Gly 구조의 아미드 그룹은 더 쉽게 가수분해되며, 분자 표면에 위치한 아미드 그룹도 분자 내부의 아미드 그룹보다 더 쉽게 가수분해됩니다.
펩타이드 용액이 산화되기 쉬운 이유에는 두 가지 주요 이유가 있습니다. 하나는 용액 내 과산화물 오염이고, 다른 하나는 펩타이드의 자발적인 산화입니다. 모든 아미노산 잔기 중에서 Met, Cys, His, Trp, Tyr 등이 가장 쉽게 산화됩니다. 산소 분압, 온도 및 완충 용액도 산화에 영향을 미칩니다.
가수분해: 펩타이드의 펩타이드 결합은 쉽게 가수분해되어 끊어집니다. Asp에 의해 형성된 펩타이드 결합은 다른 펩타이드 결합, 특히 Asp Pro 및 Asp Gly 펩타이드 결합보다 더 쉽게 끊어집니다.
잘못된 이황화 결합 형성: 이황화 결합 사이 또는 이황화 결합과 티올 그룹 사이의 교환은 잘못된 이황화 결합을 형성하여 3차 구조의 변화와 활성 손실을 초래할 수 있습니다.
라세미화: Gly를 제외하고 모든 아미노산 잔기의 알파 탄소 원자는 키랄성이고 알칼리 촉매 하에서 쉽게 라세미화 반응을 겪습니다. 그중 Asp 잔기는 라세미화 반응이 가장 잘 발생합니다.
- 제거: - 제거는 아미노산 잔기의 - 탄소 원자에 있는 작용기의 제거를 의미합니다. Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr 및 기타 잔류물은 제거를 통해 분해될 수 있습니다. - 알칼리성 pH에서는 제거가 일어나기 쉬우며, 온도와 금속이온도 영향을 미칩니다.
변성, 흡착, 응집 또는 침전은 일반적으로 3차 및 2차 구조의 파괴와 관련이 있습니다. 변성된 상태에서 펩타이드는 종종 화학 반응을 일으키기 쉽고 활성을 회복하기 어렵습니다. 펩타이드 변성 과정에서 중간체가 먼저 형성됩니다. 중간체의 용해도는 일반적으로 낮기 때문에 쉽게 응집되어 응집체를 형성하고 육안으로 볼 수 있는 침전물을 형성합니다.
단백질의 표면 흡착은 Qu 관류 중에 파이프라인 표면에 흡착되어 활동 손실을 일으키는 riL-2과 같이 저장 및 사용 중에 발생하는 또 다른 골치 아픈 문제입니다.